1 范围
本方法规定了食用菌、大米、小麦粉和小麦粉制品、淀粉和淀粉制品中11种二苯乙烯类阴离子型荧光增白剂的高效液相色谱测定方法。11种荧光增白剂包括荧光增白剂24、荧光增白剂71、荧光增白剂85、荧光增白剂90、荧光增白剂113、荧光增白剂210、荧光增白剂220、荧光增白剂264、荧光增白剂353、荧光增白剂357、荧光增白剂5bm。
本方法适用于食用菌、大米、小麦粉和小麦粉制品、淀粉和淀粉制品中11种二苯乙烯类阴离子型荧光增白剂的定量分析。
2 原理
试样经提取、净化后，采用配有荧光检测器的高效液相色谱仪检测，外标法定量。
3 试剂和材料
注：除另有说明，所有试剂均为分析纯，试验用水采用GB/T 6682规定的一级水。
3.1 试剂
3.1.1 甲醇（CH4O）：色谱纯。
3.1.2 四丁基溴化铵TBA（C16H36BrN）：色谱纯。
3.1.3 氨水（NH3·H2O）：浓度25%~28%。
3.1.4 0.1%氨水溶液：吸取0.100 mL氨水（3.1.3），加入100 mL去离子水中，混匀。
3.1.5 提取液：将甲醇（3.1.1）、水和氨水（3.1.3）按照60:39:1体积混匀。
3.1.6 TBA溶液：称取8.05 g四丁基溴化铵（3.1.2），用水定容到1 L，经0.45 μm微孔滤膜过滤后，超声脱气。
3.2 标准品
11种荧光增白剂标准品的基本信息见表1。
5.2.3流速：1.0 mL/min。
5.2.4柱温：30℃。
5.2.5检测器：激发波长350 nm，发射波长430 nm。
5.2.6进样量：20 μL。
5.3 标准曲线的制作
将标准系列工作液（3.3.3）分别按液相色谱参考条件（5.2）进行测定，得到相应的标准溶液的色谱峰面积，以标准工作液的浓度为横坐标，以色谱峰的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。
5.4 试样溶液的测定
将试样溶液（5.1.2）按液相色谱参考条件（5.2）进行测定，得到相应的样品溶液的色谱峰面积，根据标准曲线得到待测液中目标物的浓度，平行测定次数不少于两次。
6、 结果计算
试样中目标物含量按式（1）计算：
式中：
X—试样中检测目标物的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；
C—由标准曲线得出的样液中检测目标物的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；
V—试样提取过程中定容体积，单位为毫升（mL）；
m—试样称取的质量，单位为克（g）。
计算结果以重复条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。
7 精密度
在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。
8 其他
当称样量为1.00 g，定容体积10 mL时，本方法检出限为0.015 mg/kg，定量限为0.050 mg/kg。
1 ——荧光增白剂220 7 ——荧光增白剂113
2 ——荧光增白剂24 8 ——荧光增白剂357
3 ——荧光增白剂210 9 ——荧光增白剂5
4 ——荧光增白剂264 10——荧光增白剂90
5 ——荧光增白剂353 11——荧光增白剂71
6 ——荧光增白剂85
本方法负责起草单位：北京市食品安全监控和风险评估中心（北京市食品检验所）。
验证单位：山东省食品药品检验研究院、河北省食品检验研究院、国家食品质量监督检验中心（上海）、北京市理化测试分析中心、北京市产品质量监督检验院。
主要起草人：姜洁、罗晓轩、赵丽、潘红艳、陈江龙、张杉。
